Rekombinante proteïen-antigene het dikwels verskeie verskillende epitope, waarvan sommige volgorde-epitope is en sommige strukturele epitope is.Poliklonale teenliggaampies wat verkry word deur diere met gedenatureerde antigene te immuniseer, is mengsels van teenliggaampies spesifiek vir individuele epitope en kan oor die algemeen gebruik word om natuurlike strukture of gedenatureerde teikenproteïene op te spoor.'n Byvoordeel van die gebruik van gedenatureerde proteïene as immunogene is dat gedenatureerde proteïene geneig is om meer immunogeen te wees en 'n sterk immuunrespons by diere kan stimuleer.
Die uitdrukkingsisteem van Escherichia coli word gewoonlik vir antigeniese doeleindes gekies omdat dit die duurste stelsel in terme van tyd en geld is.Ten einde die moontlikheid van die teikenproteïenuitdrukking en die gemak van suiwering te verbeter, word soms slegs 'n klein fragment van die teikenproteïen, soos 'n spesifieke domein, uitgedruk.
Die driedimensionele struktuur van proteïene
Die spesifieke domein van 'n proteïen
As die doel van teenliggaamvoorbereiding uitsluitlik vir wb-opsporing is, is dit ekonomies en vinnig om sintetiese klein peptied as antigeen te gebruik, maar daar is 'n risiko van swak immunogenisiteit of nie-regenesisiteit as gevolg van onvanpaste seleksie van peptiedsegment.Aangesien teenliggaamvoorbereiding 'n lang tydperk vereis, word twee of drie verskillende peptiedsegmente dikwels gekies om teenliggaampies voor te berei deur polipeptiedantigeen te gebruik om die suksessyfer van die eksperiment te verseker.
Die suiwerheid van polipeptiedantigeen vir immunisering moet meer as 80% wees.Alhoewel 'n hoër suiwerheid teoreties teenliggaampies met beter spesifisiteit kan verkry, produseer diere in die praktyk altyd 'n groot aantal nie-spesifieke teenliggaampies, wat dus die voordele van antigeensuiwerheid masker.
Boonop moet die voorbereiding van teenliggaampies van klein peptiede aan die toepaslike draerantigeen gekruis word om die immunogenisiteit daarvan te verbeter.Twee algemene antigene draers is KLH en BSA.
Postyd: 23-Mrt-2023