Fosforylasie -modifikasie speel 'n belangrike rol in die lewensduur van selle en beïnvloed verskeie aspekte. Die fosforilering van proteïene hou nou verband met verskillende biologiese prosesse, soos herstel van DNA -skade, transkripsie -regulering, seintransduksie en die regulering van sel apoptose. Die bestudering van gefosforyleerde proteïene en peptiede help om die meganismes van hierdie prosesse te openbaar en ons begrip van die kern van lewensaktiwiteite te verdiep. Hong -peptied -biotegnologie het volwasse fosforilasie -peptiedetiketteringstegnologie. As ons sy eie tegnologiese en grondstofvoordele benut, kan ons peptiede wat gefosforyleerde serien (PSER), gefosforyleerde treonien (PTHR) en gefosforyleerde tyrosien (PTYR) bevat, en voorsien van hoë gehalte peptiede met een tot vyf fosforylasie.
Oorsig van fosforyleringstegnologie:
Gefosforyleerde peptiede verwys hoofsaaklik na die sykettinghidroksielgroepe serien (Ser), tyrosien (Tyr) en treonien (THR) residue in die peptiedketting wat in suurfosfaatesters gemodifiseer word. Gefosforyleerde peptiede speel 'n belangrike rol in die studie van proteïenfosforilering. Daarom is dit veral belangrik om die fosforileringsreaksies van proteïene en peptiede diep te ondersoek en volwasse en eenvoudige sintetiese metodes te vind.
Op die oomblik val die metodes vir fosforileringsmodifikasie van peptiede hoofsaaklik in twee kategorieë:
(1) bevat die toepaslike beskermde gefosforileerde aminosure direk in die peptiedvolgorde:
Eerstens word die aminosure wat gefosforileer moet word (soos THR, Ser of Tyr) aan fosforilasiebehandeling onderwerp en toepaslik beskerm. Na die konvensionele vaste-fase-peptiedsintese (SPPS) -proses, word die gefosforileerde monomere gekoppel aan die spesifieke terreine van die polipeptied. Hierdie metode is maklik om te bedryf en het een van die belangrikste tegnieke geword vir die wysiging van peptiede vir puntfosforilering.
(2) Nadat die polipeptiedvolgorde op die hars gesintetiseer is, is die syketting -hidroksielgroepe van Ser, Tyr of THR gefosforileer:
Wanneer die metode om die gefosforyleerde monomere in die polipeptied direk aangeneem te word, word die gefosforileerde aminosuur aangeneem as die metode om die gefosforileerde aminosuur direk te kondenseer. Boonop sal die bekendstelling van daaropvolgende aminosure ook relatief ingewikkeld raak, veral as daar veelvuldige fosforilasie -terreine is. Die sinteseproses sal uiters moeilik wees, en die finale produk sal baie ingewikkeld wees, wat die skeiding bemoeilik en die opbrengs buitengewoon laag. Daarom, as daar veelvuldige terreine is wat fosforilering in die polipeptiedketting benodig, kan dit oorweeg word om die sintese van die polipeptiedvolgorde op die hars te voltooi, en dan die syketting -hidroksielgroepe van Ser, Tyr of THR te fosforileer. Tydens hierdie proses, verwyder eers die sykettingbeskermingsgroepe van die aminosuur wat gemerk moet word, selektief. Vir Tyr en THR kan die onbeskermde aminosure van hul sykettings direk reageer. Die sykettingbeskermingsgroepe kan kwantitatief verwyder word onder die toestand van 1% TFA/DCM. In hierdie metode kan die aktiewe intermediêre van bis-benzylfosforamidaat en tetrazol gegenereer word deur die reaksie met laasgenoemde, en dit kan aan die hidroksielgroep gekoppel word. Dan kan 'n oksidasie -reaksie onder peroksiedsuurtoestande uitgevoer word om die fosfonielgroep te genereer, wat die fosforilering voltooi.
Postyd: 2025-07-16