Die chemiese weerstand van peptiede hang af van die samestelling en volgorde van aminosure. Gevriesde peptiede is oor die algemeen duursamer as hul eweknieë in oplossing. Potensiële afbraakmetodes van peptiede is soos volg:
1, hidrolise: Dit word gewoonlik by die ASP in die volgorde (D) opgeneem vir die probleem in die peptied, dit word baie maklik ontwater om 'n ring imide -tussenproduk te vorm. Daar is byvoorbeeld ASP in die volgorde. -PRO (DP) In hierdie geval sou die ringvormige iMide-intermediêr wat deur suurkatalise geproduseer word, lei tot die splitsing van die peptiedketting. Net so is Asp-Gly (DG) in die volgorde aanwesig en in hierdie geval kan die sirkelvormige tussenproduk in die oorspronklike ASP-modus van isoaspartiensuur (onskadelik) of 'n potensieel onaktiewe analoog gehidroliseer word. Laastens kan alle asparaginsuurpatrone heeltemal omgeskakel word na isoaspartiensuuranaloë. "Op 'n kleiner vlak bevat dit ser (s), 'n volgorde wat ook 'n sirkelvormige imide -tussenproduk vorm wat uiteindelik die peptiedketting skoonmaak."
2, Deamidasie: Hierdie basis gekataliseerde reaksie kom dikwels voor in die teenwoordigheid van ASN-Gly (NG) of Gln-Gly (QG) in die volgorde en volg 'n soortgelyke ASP-GLY (DG) volgorde-meganisme. Deaminasie (amienverlies) in die ASN-GLY-volgorde lewer 'n sikliese imied-tussenproduk, wat dan gehidroliseer word om ASN-asparaginsuur of isoaspartiensuuranaloë op te lewer. Daarbenewens kan die ringimied-tussenproduk D-ASP of eksterne derotasie veroorsaak aan ASND-iso-iets soortgelyk aan ASP, wat almal onaktief kan wees.
3, oksidasie: Cys en Met -residue is die belangrikste residue wat omkeerbare oksidasie ondergaan. Die oksidasie van cysteïne word versnel by hoër pH -waardes, waar die tiol makliker protonasie verwyder en geneig is om disulfiedbindings in of tussen kettings te genereer. Die disulfiedbinding kan maklik omgekeer word deur behandeling met dithiotreitol (DTT) of Tris (2-karboksieletielfosfien) hidrochloried (TCEP). Metionien word deur chemiese en fotochemie geoksideer om metioniendioksied te produseer, wat verder metioniendioksied binnedring, wat albei moeilik is om te keer.
4, Diketopiperazine en pyroglutamic Acid Production: Formation of Dimethylpiperazine vind gewoonlik plaas wanneer Gly in die derde posisie van die N-terminus is, veral as pro of gly in posisie 1 of 2 is. Hierdie reaksie behels nukleofiele aanval van die N-terminale nitrogen op die amide-benzylgroep tussen die tweede amino-suur en die derde amino-suur Die Diketopiperazine -metode. Aan die ander kant, as GLN by die N-terminus geleë is, is pyroglutamiensuurvorming byna onvermydelik. Dit is 'n soortgelyke reaksie waarin die N-terminale stikstof die sy-kettingbasis-koolstof van Gln aanval om die deaminasie van 'n pyroglutamylpeptied-analoog te vorm. Hierdie omskakeling vind ook plaas met die N-terminus wat pyroglutamaat-peptiedanaloë bevat.
5. Racemization: Hierdie term word wyd gebruik om te verwys na die algehele verlies aan chirale integriteit van 'n aminosuur of peptied. Racemization behels die omskakeling van 'n aminosuur van 'n basis-gekataliseerde enantiomeer, gewoonlik L-vorm, na tipe 1 van die L-en D-vorm enantiomere. : 1. Mengsel. Dit is belangriker tydens peptiedgenerering, maar minder problematies in die voltooide peptied. Daarbenewens is die skakelaar moeilik om op te spoor en kan dit nie beheer word nie.
'N Algemene benadering om peptieddegradasie te vermy of te minimaliseer, is om die peptied te degradeer tot-20 ° C of beter-80 ° C vir gevriesdroogde opberging, indien beskikbaar. As die peptied in waterige oplossing is, moet elke aliquot -monster gevries word om te vries en te ontdooi. Blootstelling aan pH & GT moet vermy word; Medium 8. As pH & gt egter nodig is; As die peptied op 8 smelt, moet die blootstelling daarvan minimaal wees.
Postyd: 2025-07-01