Rekombinante proteïenantigene het dikwels verskillende epitope, waarvan sommige volgorde -epitope is, en sommige is strukturele epitope. Poliklonale teenliggaampies verkry deur diere met gedenatureerde antigene te immuniseer, is mengsels van teenliggaampies wat spesifiek vir individuele epitope is en kan in die algemeen gebruik word om natuurlike strukture of gedenatureerde teikenproteïene op te spoor. 'N Newe -voordeel van die gebruik van gedenatureerde proteïene as immunogene is dat gedenatureerde proteïene geneig is om meer immunogeen te wees en 'n sterk immuunrespons by diere kan stimuleer.
Die uitdrukkingstelsel van Escherichia coli word gewoonlik vir antigeniese doeleindes gekies omdat dit die duurste stelsel is wat tyd en geld betref. Ten einde die moontlikheid van die teikenproteïenuitdrukking en die gemak van suiwering te verbeter, word soms slegs 'n klein fragment van die teikenproteïen, soos 'n spesifieke domein, uitgedruk.
Die driedimensionele struktuur van proteïene
Die spesifieke domein van 'n proteïen
As die doel van die voorbereiding van teenliggaampies uitsluitlik vir WB-opsporing is, is dit ekonomies en vinnig om sintetiese klein peptied as antigeen te gebruik, maar daar is 'n risiko vir swak immunogeniteit of nie-regeniteit as gevolg van onvanpaste seleksie van peptiedsegment. Aangesien teenliggaampreparaat 'n lang periode benodig, word twee of drie verskillende peptiedsegmente dikwels gekies om teenliggaampies met behulp van polipeptiedantigeen voor te berei om die suksessyfer van die eksperiment te verseker.
Die suiwerheid van polipeptiedantigeen vir immunisering moet groter as 80%wees. Alhoewel 'n hoër suiwerheid teoreties teenliggaampies met 'n beter spesifisiteit kan verkry, produseer diere in die praktyk altyd 'n groot aantal nie-spesifieke teenliggaampies, wat die voordele van antigeen-suiwerheid verberg.
Daarbenewens moet die voorbereiding van teenliggaampies van klein peptiede aan die toepaslike draerantigeen gekoppel word om die immunogeniteit daarvan te verbeter. Twee algemene antigeniese draers is KLH en BSA.
Postyd: 2025-07-03