Na chemiese sintese van peptiede deur vaste-fase FMOC, is daar baie metodes van splitsing, en twee basiese soorte word nou bekendgestel wat ons gereeld gebruik.
1. Sterk suurmetode (TFA)
Die droë hars is in 'n skudfles geplaas en 'n toepaslike hoeveelheid aasdiere wat bevat, is bygevoeg. (Scavengers) Trifluoroacetic Acid Cutting Reagent (TFA), 10-25 ml/g hars, bedek en af en toe geskud by kamertemperatuur met rotasie. Die hars is gedreineer, 2-3 keer met nuwe TFA gewas, die filtraat is gekombineer, en 8-10 keer is die volume ys-diethylether laat val. Soms kan sommige TFA gestoom word om ruwe peptied neerslag te kry. Ether kan gebruik word om die neerslagdoeltreffendheid deur ysgesteunde verkoeling te verhoog. Uiteindelik is die neergesette ru -peptiedproduk versamel.
Geskikte hars: Wang -hars of baan amiedhars
2, swak suurmetode (TFA of asynsuurverdunning) 1% TFA:
1 g hars wat peptiede bevat, is bygevoeg tot 'n glasskudding van dichloormetaanoplossing wat 1%TFA bevat, vir 2 minute verseël en geskud. Die filtraat is met stikstof in 'n ander nuwe metanol -skudkolf wat 10% piridien bevat, gedruk, en die prosedure is tien keer herhaal. Die beskermende peptiede wat op die hars oorbly, is drie keer met 30 ml DCM en 30 ml MeOH gewas. Reste is deur TLC of HPLC gekontroleer en skoongemaak. Al die filtrate is gekombineer en 5% van die oplosmiddel is onder verlaagde druk gekook. Veertig ml water is bygevoeg en neerslag met die koelmengsel. Na filtrasie is die produk drie keer met skoon water gewas, in 'n vakuumdroogoond geplaas en met KOH of P2O5 gedroog.
Verdunde asynsuur:
Peptiede wat aan die hars gehang is, is 2 uur met 'n snyoplossing behandel met behulp van ACOH // TFE/DCM (2: 2: 6), die hars is gefiltreer en die hars is drie keer met snyoplossing gewas. Die oortollige asynsuur is verwyder deur 15-voudige n-heksaan by die gemengde filtraat en draai-steiling te voeg.
Aansoekhars: 2-CTC-hars
Postyd: 2025-07-01